طراحی کیت سنجش آنتی ژن P24 ویروس HIV با استفاده از آنتی بادی منوکلونال انسانی

Authors

  • رضا حاجی حسینی گروه بیوشیمی، دانشگاه پیام نور تهران
  • سید مهدی بوترابی شرکت پیشتاز طب
  • علی میرجلیلی گروه بیوتکنولوژی، انستیتو واکسن و سرم سازی رازی
Abstract:

سابقه و هدف: چندین روز پس از عفونت با ویروس HIV و قبل از تغییرات سرمی در مرحله وجود RNA ویروس در خون، آنتی ژن p24 در خون قابل سنجش است. مطالعات نشان می دهد در مراحل اولیه عفونت آنتی ژن p24 بسیار زودتر از آنتی بادی بر علیه ویروس ظاهر می شود. بنابراین ارزیابی آنتی ژن p24 ویروس می تواند شاخص مناسبی برای تشخیص عفونت در مراحل اولیه بیماری باشد. هدف از این پژوهش استفاده از روش الایزا برای تشخیص آنتی‌ژن p24 با حساسیت و ویژگی بالا و مقایسه آن با روش های دیگر تشخیصی به منظور تشخیص عفونت در مراحل اولیه می باشد. مواد و روش ها: 300 نمونه خون با کیت نسل سوم تعیین آنتی بادی بر علیه HIV مورد آزمایش قرار گرفت. 30 نمونه مثبت از مرکز تحقیقات ایدز و از بیماران تایید شده با روش ایمونوبلات و NAT جمع آوری شد. تمام نمونه ها با کیت طراحی شده آنتی ژن p24 به روش الیزا مورد بررسی قرار گرفت. برای حذف اثر تداخلی احتمالی وجود آنتی بادی بر علیه آنتی ژن p24 ، نمونه سرم هایی که تست آنتی بادی آنها مثبت بود با محلول های مختلفی مانند بافر گلیسین 5/1 مولار با pH 2 ، اسید کلریک 5/0 نرمال، ترایتون X-100 با غلظت 1/0 درصد، بافر قلیایی شماره 1 و شماره 2 مجاور شدند. نتایج: از 30 نمونه مثبت در 21 مورد تست آنتی ژن در کیت طراحی شده با آنتی بادی منوکلونال انسانی و 18 مورد در کیت طراحی شده با آنتی بادی منوکلونال موشی قبل از مجاورت با محلول گلیسین مثبت شد (حساسیت تشخیصی به ترتیب 70% و 60%). پس از مجاور سازی 28 نمونه در کیت طراحی شده با آنتی بادی منوکلونال انسانی و 27 مورد در کیت طراحی شده با آنتی بادی منوکلونال موشی مثبت شد (حساسیت تشخیصی به ترتیب 93% و 90%). در کیت طراحی شده برای تشخیص آنتی ژن p24 حد مرزی بر مبنای جذب نوری نمونه های منفی 15/0 (معادل 2 پیکوگرم در میلی لیتر آنتی ژن p24) تعیین شد. اختلاف بین میانگین جذب نوری نمونه های مثبت و منفی در تست آنتی ژن از نظر آماری با 005/0p< قابل توجه بود (جذب نوری 6/1 در مقابل 08/0). حساسیت آنالیتیک سنجش  با استفاده از آنتی بادی منوکلونال انسانی و استفاده از آنتی ژن WHO 1 واحد  در میلی لیتر و با آنتی ژن نوترکیب 2 پیکوگرم در میلی لیتر بدست آمد که در استفاده از آنتی بادی منوکلونال موشی این مقدار به ترتیب  4  و 8 بود. بر اساس نتایج حاصل از نمونه های منفی اختصاصیت سنجش 100% محاسبه گردید. مجاور سازی نمونه سرم های مثبت و نمونه هایی از پانل BBI دارای تست آنتی ژن و آنتی بادی و PCR بافر گلیسین 5/1 مولار با pH 2 باعث افزایش حساسیت تشخیصی گردید (70% در مقابل 93%). نتیجه گیری: این تست حساسیت و ویژگی بالایی برای تشخیص HIV دارد و در مقایسه با روش های دیگر تشخیص، ساده، سریع، دقیق و از نظر اقتصادی مقرون به صرفه می باشد. از این تست در غربالگری نوزادان تولد یافته از مادران HIV مثبت و همچنین تعیین تکلیف در مورد افرادی که تست الیزا نسل چهارم مثبت داشته ولی تست وسترن بلات آن را تائید نکرده می توان استفاده کرد.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

طراحی کیت سنجش آنتی ژن p24 ویروس hiv با استفاده از آنتی بادی منوکلونال انسانی

سابقه و هدف: چندین روز پس از عفونت با ویروس hiv و قبل از تغییرات سرمی در مرحله وجود rna ویروس در خون، آنتی ژن p24 در خون قابل سنجش است. مطالعات نشان می دهد در مراحل اولیه عفونت آنتی ژن p24 بسیار زودتر از آنتی بادی بر علیه ویروس ظاهر می شود. بنابراین ارزیابی آنتی ژن p24 ویروس می تواند شاخص مناسبی برای تشخیص عفونت در مراحل اولیه بیماری باشد. هدف از این پژوهش استفاده از روش الایزا برای تشخیص آنتی ...

full text

طراحی کیت سنجش آنتی ژن p24 ویروس hiv با استفاده از انتی بادی منوکلونال انسانی

چکیده برای ارزیابی نقش آنتی ژن 24p به عنوان یک شاخص در عفونت ویروس hiv طراحی یک روش سنجش ایمنی ساده و حساس برای تشخیص این آنتی ژن مورد یررسی قرار گرفت. 300 نمونه منفی با کیت نسل سوم آنتی بادی بر علیه hiv مورد آزمایش قرار گرفت وهمچنین30 نمونه مثبت از مرکز تحقیقات ایدز و از بیماران تایید شده با روش ایمونوبلات و nat جمع آوری شد. تمام نمونه ها با کیت طراحی شده با آنتی ‍ژن 24p به روش الیزا مورد آز...

15 صفحه اول

طراحی کیت سنجش آنتی ژن p۲۴ ویروس hiv با استفاده از آنتی بادی منوکلونال انسانی

سابقه و هدف: چندین روز پس از عفونت با ویروس hiv و قبل از تغییرات سرمی در مرحله وجود rna ویروس در خون، آنتی ژن p24 در خون قابل سنجش است. مطالعات نشان می دهد در مراحل اولیه عفونت آنتی ژن p24 بسیار زودتر از آنتی بادی بر علیه ویروس ظاهر می شود. بنابراین ارزیابی آنتی ژن p24 ویروس می تواند شاخص مناسبی برای تشخیص عفونت در مراحل اولیه بیماری باشد. هدف از این پژوهش استفاده از روش الایزا برای تشخیص آنتی ...

full text

بررسی حساسیت نسبی کیت های نسل سوم سنجش آنتی بادی ضد ویروس هپاتیت C به روش الیزا: ارزیابی 20 کیت

  چکید ه   سابقه و هدف   مهم‌ترین چالش برای انتخاب کیت‌های سنجش آنتی بادی ضد ویروس هپاتیت C ، حساسیت آن است. در این مطالعـه20 کیت (با روش الیزا) با یکدیگـر و با کیت مرجـع مطـابق با توصیـه سـازمـان جهانـی بهـداشتAnti-HCV 3.0 Enhanced SAVE) محصول کمپانی ارتو) مقایسه گردیدند.   مواد و روش‌ها   مطالعه انجام شده از نوع تشخیصی بوده و20 کیت به وسیله 3 تا 4 پانل دگرگونی سرمی و 2 تا 3 پانل سطح کارآیی مو...

full text

تولید آنتی بادی منوکلونال موشی بر ضد آنتی ژن سطحی ویروس هپاتیت نوع b

آنتی بادیهای منوکلونال از طریق هیبریداسیون سلولی و تولید سلولهای هیبریدوما که نامیرا هستند ترشح شده و به صورت اختصاصی عمل کرده و یک اپی توپ خاص را شناسایی می کنند. هیبریدوما از ادغام سلولهای لنفوسیت با عمر محدود و تولید کننده آنتی بادی با سلولهای نامیرای میلوما بوجود میآید.از آنتی بادیهای منوکلونال در مطالعات دارویی، تشخیص بیماریها ودرمان برخی بیماریها مانند عفونتها و سرطانها استفاده می شود....

15 صفحه اول

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


Journal title

volume 2  issue شماره 2 (پیاپی 3)

pages  81- 88

publication date 2009-07-01

By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023